在WB过程中从SDS-PAGE胶上转移蛋白至膜上是非常关键的步骤 ！优化转移时间往往需要实验多次 ，下面就讲几条关于如何保证蛋白完全转移的小技巧，适合新手参考:
使用预染的marker 预染marker不仅能够直观的观察到跑胶情况 ，而且在转移过程中也是很好的工具，在完成印迹后观察膜上的 marker ，看是否所有条带都已经转移至膜上。
在转印装置中加两块膜 小分子量的蛋白转移的比较快 ，而为保证大分子蛋白的转印 ，长时间的转印可能使小分子蛋白透过膜 ，因此，可以加入两块膜 ，如果能在第二块膜上检测到小分子蛋白，说明转印时间过长。
在转印后对胶染色 如果转印时间不够优化，通过对胶染色，在胶上能够观察到未转移完全的蛋白 ，这种情况在转印大分子蛋白是常见，使用银染或者考马斯亮蓝的方法都可以 。
二 、Western blot转印的优化
从SDS凝胶中进行Western蛋白转印的优化需要对一系列参数进行考虑 。目的是转印所有凝胶上的蛋白并将其定 |
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